Projekt: Stanovení bilirubinu v séru

Princip:
Bilirubin vytváří kopulací s diazotovanou kyselinou sulfanilovou azobarvivo, které je vhodné k fotometrickému stanovení. Reakce nekonjugovaného bilirubinu (tj. bilirubinu, který je v krvi transportován ve vazbě na albumin) je pomalá, ale urychluje ji přídavek tzv. akcelerátoru, který uvolní bilirubin z albuminu. Konjugovaný bilirubin (bilirubindiglukosiduronát) se kopuluje s diazoniovou solí velmi rychle, odtud název “přímý bilirubin”, zatímco nekonjugovaný bilirubin se nazývá “bilirubin nepřímý”. Stanovení celkového bilirubinu v séru (přímý + nepřímý) se provádí v roztoku akcelerátoru, stanovení přímého bilirubinu bez akcelerátoru.

Reagencie:
* akcelerátor (roztok kofeinu v benzoátu sodném)
* fyziologický roztok
* DIAZO I (kyselina sulfanilová v HCl)
* DIAZO II (dusitan sodný) ! pozor jed!
* FEHLING II (vínan sodno-draselný, NaOH)
* BILIRUBIN standard, krevní sérum (Lyonorm)